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核酸清除试验
中科检测可以针对核酸去除剂,核酸清除剂,核酸降解剂,核酸降解仪等核酸清除产品检测,开展核酸气溶胶污染的空气清除试验检测。
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试验背景
核酸检测技术已成为血液筛查实验室的重要实验手段,但因其灵敏度高的特点,同时实验室也容易受到污染,特别是核酸的气溶胶污染比较严重。
在新冠病毒核酸检测过程中,常见以下几种污染类型:扩增片段的污染(产物污染);天然基因组 DNA的污染,试剂污染(贮存液或工作液)以及样本间交叉污染。
核酸检测实验室污染的主要来源是扩增产物的污染。 目前国内所有二级以上综合医院都具备了核酸检测能力,大部分医院也设立了PCR 实验室,高强度的核酸检测任务已成为了检验员的工作常态,如果一旦出现实验室核酸污染,可能会造成假阳性的结果,导致结果不可信,甚至可能会危及实验室工作人员安全。 核酸实验室污染后难以清除,有可能造成实验室不能使用的风险。
如果一旦出现核酸实验室污染,除了常规的清洁消毒方法之外,还可以进行通过空间灭菌方法进行核酸清除试验。
试验对象
中科检测可以针对核酸去除剂,核酸清除剂,核酸降解剂,核酸降解仪等核酸清除产品检测,开展核酸气溶胶污染的空气清除试验检测。
试验方法
1.核酸清除试验检测设备
3m3试验舱,二级生物安全柜,荧光定量PCR仪,涡旋混匀器,低温冰箱,低温高速离心机,PCR专用微量移液器,水浴锅。
2. 核酸清除试验试剂耗材
病毒DNA/RNA提取试剂盒,ASFV基因质粒荧光定量qPCR试剂盒,TE缓冲液,96~100%乙醇,超纯水,去RNA酶水,PBS溶液等。
3. 核酸清除试验步骤
1)样品配制:根据客户要求倍比稀释,待用;
2)将稀释好的核酸降解剂加入到消毒喷雾设备中,将设备放入3m3试验舱中,连接电源并设置好喷雾程序,待用;
3)试验样品的制备:在对照组和样品组植绒棉签上各加50μL阳性对照,固定在EP管架上待其自然风干;
4)将其中对照组植绒棉签放置在室温下(不熏蒸),样品组植绒棉签固定在EP管架上放入试验舱中,关紧舱门;
5)通过橡胶手套按下消毒喷雾设备的启动键,喷雾10min,待喷雾结束后开始计时;
6)静置密闭2h后,通过传递舱将试验组的植绒棉签取出,开启净化30 min;
7)将每支植绒棉签在1mL离心管中各自用1mLTE缓冲液进行洗脱,取200μuL进行核酸提取;
8)配制标准曲线,然后进行qPCR试验。
4. 结果计算

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